黃瀟瀟
[摘 要]目的：建立小兒氨酚黃那敏顆粒中對(duì)乙酰氨基酚的測(cè)定方法。方法：采用標(biāo)準(zhǔn)化的色譜柱，以甲醇一水（40：60）為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)275 nm，對(duì)進(jìn)樣量進(jìn)行合理控制。結(jié)果：對(duì)乙酰氨基酚在標(biāo)準(zhǔn)條件下線性良好，平均回收率為116.6%。結(jié)論：該法簡(jiǎn)便快速、重復(fù)性好，可用于該制劑的質(zhì)量控制。
[關(guān)鍵詞]小兒氨酚黃那敏顆粒；對(duì)乙酰氨基酚；高效液相色譜法；含量測(cè)定
中圖分類號(hào)：TM459 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1009-914X（2016）10-0343-01
小兒氨酚黃那敏顆粒是一種臨床比較常用的復(fù)方制劑，主要適用于緩解兒童普通感冒及流行性感冒所引起的發(fā)熱、頭痛以及打噴嚏、流鼻涕等癥狀，具有較好的應(yīng)用價(jià)值。現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)小兒感冒藥中乙酰氨基酚的含量測(cè)定存在一定的局限性，因而采取高效液相色譜法對(duì)小兒氨酚黃那敏顆粒中乙酰氨基酚進(jìn)行含量測(cè)定，具有重要的現(xiàn)實(shí)意義，并取得了較好的測(cè)定效果。
1 測(cè)定實(shí)驗(yàn)中儀器與試藥
在高效液相色譜法測(cè)定小兒感冒藥中乙酰氨基酚含量的實(shí)驗(yàn)中，選用國(guó)外先進(jìn)的高效液相色譜儀和二級(jí)管陣列檢測(cè)器作為乙酰氨基酚含量測(cè)定的專用設(shè)備，確保這兩種設(shè)備的實(shí)際性能滿足實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)。先用專業(yè)化的超聲波清洗器和電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱，確保乙酰氨基酚含量測(cè)定的精準(zhǔn)性和可靠性，與此同時(shí)，選用國(guó)外先進(jìn)的紫外分光光度計(jì)，以促進(jìn)含量測(cè)定實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行。
在試藥方面，選用乙酰氨基酚的對(duì)照品，確保其質(zhì)量和規(guī)格滿足國(guó)家藥品生物制品檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)，與此同時(shí)進(jìn)行甲醇、娃哈哈純凈水的配備。所選用的小兒氨酚黃那敏顆粒均購(gòu)自于不同的廠家，其中每袋內(nèi)乙酰氨基酚以及人工牛黃等的含量具有一定的一致性。
2 實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果
2.1明確色譜條件。在高校液相色譜法對(duì)小兒氨酚黃那敏顆粒中乙酰氨基酚的含量進(jìn)行測(cè)定的實(shí)驗(yàn)操作中，對(duì)色譜條件以及流動(dòng)相進(jìn)行明確，流動(dòng)相為甲醇-水，并將實(shí)際流速和進(jìn)樣量控制在合理范圍內(nèi)，對(duì)實(shí)驗(yàn)中的檢測(cè)波長(zhǎng)進(jìn)行明確，乙酰氨基酚對(duì)照品與樣品的色譜圖分別建圖1。
2.2對(duì)照品溶液的制備操作。在本實(shí)驗(yàn)中，精密稱取標(biāo)準(zhǔn)溫度條件下干燥至標(biāo)準(zhǔn)重量的乙酰氨基酚的對(duì)照品適量，置于容量瓶?jī)?nèi)，并通過(guò)娃哈哈純凈水進(jìn)行稀釋，至刻度后進(jìn)行搖勻，即可能到標(biāo)準(zhǔn)的乙酰氨基酚對(duì)照品溶液。
2.3樣品溶液的制備操作。在本實(shí)驗(yàn)中，分別選取購(gòu)買自不同廠家的不同規(guī)格的小兒氨酚黃那敏顆粒數(shù)袋，經(jīng)研磨至標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)后，精密稱取適量并置于標(biāo)準(zhǔn)的容量瓶?jī)?nèi)，加哇哈哈純凈水進(jìn)行稀釋，稀釋至刻度后可采用專業(yè)的濾膜進(jìn)行過(guò)濾，留作備用。
2.4對(duì)實(shí)驗(yàn)中的線性關(guān)系進(jìn)行測(cè)定和明確。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，分別稱取對(duì)照品溶液適量，加入50ml容量瓶?jī)?nèi)進(jìn)行定容操作，并對(duì)定容后的濃度進(jìn)行準(zhǔn)確的記錄，從而得出色譜流出曲線。在此基礎(chǔ)上，以乙酰氨基酚濃度為橫坐標(biāo)，以峰面積為縱坐標(biāo)，做標(biāo)準(zhǔn)化的線性回歸方程，線性回歸顯示，乙酰氨基酚濃度范圍與峰面積具有良好的線性關(guān)系。
2.5對(duì)實(shí)際精密度進(jìn)行準(zhǔn)確的測(cè)定。在本實(shí)驗(yàn)中，對(duì)同一種對(duì)招聘溶液進(jìn)行重復(fù)進(jìn)樣操作，并對(duì)每次進(jìn)樣的對(duì)照品溶液的量進(jìn)行合理的控制，可以發(fā)現(xiàn)本實(shí)驗(yàn)過(guò)程中儀器具有良好的精密度。
2.6進(jìn)行重復(fù)性試驗(yàn)操作。在本實(shí)驗(yàn)中，按照色譜條件，對(duì)藥品供試品溶液進(jìn)行重復(fù)進(jìn)樣，并對(duì)各種藥品溶液中的乙酰氨基酚色譜峰峰面面積進(jìn)行明確，實(shí)驗(yàn)表明高效液相色譜法具有良好的重復(fù)性和應(yīng)用性。
2.7對(duì)穩(wěn)定性進(jìn)行測(cè)定。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，嚴(yán)格按照色譜條件進(jìn)行進(jìn)樣操作，并對(duì)峰面積進(jìn)行準(zhǔn)確的記錄，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，實(shí)驗(yàn)中樣品溶液在5小時(shí)之內(nèi)具有較好的穩(wěn)定性。
2.8對(duì)加標(biāo)回收率進(jìn)行準(zhǔn)確的測(cè)定。在實(shí)驗(yàn)中，選取同一批的含量已定的小兒氨酚黃那敏顆粒樣品適量，分別加入對(duì)乙酰氨基酚適量，在高效液相色譜法測(cè)定條件下進(jìn)行測(cè)定，可以明確乙酰氨基酚的總平均回收率，詳情見表1。
2.9對(duì)樣品進(jìn)行準(zhǔn)確可靠地測(cè)定。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，選取處理好的標(biāo)準(zhǔn)樣品溶液適量，按照高效液相色譜條件進(jìn)行測(cè)定，并嚴(yán)格按照外標(biāo)法對(duì)乙酰氨基酚含量進(jìn)行計(jì)算，實(shí)際樣品含量均在80%以上。
3 討論
3.1溶劑的選取。實(shí)驗(yàn)研究顯示，以流動(dòng)相和純凈水分別作為溶劑對(duì)乙酰氨基酚含量進(jìn)行測(cè)定，發(fā)現(xiàn)并不存在明顯差異，因而在高效液相色譜法對(duì)小兒感冒藥中乙酰氨基酚含量進(jìn)行測(cè)定時(shí)，可以選用廉價(jià)易得的純凈水作為溶劑，來(lái)對(duì)式樣樣品進(jìn)行溶解操作。
3.2對(duì)流動(dòng)相進(jìn)行選取。相關(guān)資料研究顯示，高效液相色譜法進(jìn)行乙酰氨基酚含量測(cè)定的過(guò)程中，流動(dòng)相對(duì)位甲醇、三乙胺溶液、磷酸溶液等。而在本實(shí)驗(yàn)中，主要采用甲醇：水（40：60）作為流動(dòng)相，實(shí)際操作具有一定的便捷性和可靠性，操作簡(jiǎn)單且出峰時(shí)間較快。對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行觀察和分析可以發(fā)現(xiàn)，甲醇：水（40：60）作為流動(dòng)相時(shí)，實(shí)際分離度較高且峰形對(duì)稱，試驗(yàn)后色譜柱的沖洗也比較簡(jiǎn)便，具有良好的適用性。
3.3測(cè)定波長(zhǎng)的選擇。對(duì)對(duì)乙酰氨基酚紫外吸收波長(zhǎng)進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果顯示樣品溶液在275 nm處有最大吸收。因此本實(shí)驗(yàn)選擇275 nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)。此時(shí)檢測(cè)基線穩(wěn)定，對(duì)乙酰氨基酚前后雜質(zhì)干擾小。
3.4高效液相色譜法，又稱“高壓液相色譜”、“近代柱色譜”等。高效液相色譜是色譜法的一個(gè)重要分支，以液體為流動(dòng)相，采用高壓輸液系統(tǒng)，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動(dòng)相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內(nèi)各成分被分離后，進(jìn)入檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)試樣的分析。該方法已成為化學(xué)、醫(yī)學(xué)、工業(yè)、農(nóng)學(xué)、商檢和法檢等學(xué)科領(lǐng)域中重要的分離分析技術(shù)。
高效液相色譜法分析速度快、載液流速快，分離效能高。可選擇固定相和流動(dòng)相以達(dá)到最佳分離效果，比工業(yè)精餾塔和氣相色譜的分離效能高出許多倍。應(yīng)用范圍廣，百分之七十以上的有機(jī)化合物可用高效液相色譜分析，特別是高沸點(diǎn)、大分子、強(qiáng)極性、熱穩(wěn)定性差化合物的分離分析，顯示出優(yōu)勢(shì)。
高效液相色譜還有色譜柱可反復(fù)使用、樣品不被破壞、易回收等優(yōu)點(diǎn)，但也有缺點(diǎn)，與氣相色譜相比各有所長(zhǎng)，相互補(bǔ)充。高效液相色譜的缺點(diǎn)是有“柱外效應(yīng)”。在從進(jìn)樣到檢測(cè)器之間，除了柱子以外的任何死空間中，如果流動(dòng)相的流型有變化，被分離物質(zhì)的任何擴(kuò)散和滯留都會(huì)顯著地導(dǎo)致色譜峰的加寬，柱效率降低。高效液相色譜檢測(cè)器的靈敏度不及氣相色譜。
參考文獻(xiàn)
[1] 閆海燕-高效液相色譜法測(cè)定小兒氨酚黃那敏顆粒中對(duì)乙酰氨基酚的含量《安徽醫(yī)藥》，2011.
[2] 劉旺培，黃義純 -高效液相色譜法測(cè)定小兒氨酚黃那敏顆粒中對(duì)乙酰氨基酚的含量《首都醫(yī)藥》，2008.
[3] 閆海燕 -高效液相色譜法測(cè)定小兒氨酚烷胺顆粒中對(duì)乙酰氨基酚的含量《化學(xué)與生物工程》-2011.
