RP HPLC測定藏木香中土木香內(nèi)酯和異土木香內(nèi)酯含量.pdf
張秀娟+丁永輝+倪琳+楊錫
摘要：目的 建立同時測定三味甘露散中土木香內(nèi)酯、異土木香內(nèi)酯含量的方法。方法 采用高效液相色譜法，光電二極管陣列檢測器，色譜柱為CAPCELL PAK MG C18（4.6 mm×250 mm，5 μm），流動相為乙腈-0.4%磷酸（58∶42），流速1.0 mL/min，檢測波長225 nm，柱溫30 ℃。結(jié)果 土木香內(nèi)酯在0.083～0.517 μg、異土木香內(nèi)酯在0.108～0.672 μg范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系，r=0.999 9；土木香內(nèi)酯平均加樣回收率為97.95%，RSD=1.31%；異土木香內(nèi)酯平均加樣回收率為97.69%，RSD=1.24%。結(jié)論 本方法操作簡便，可快速、準(zhǔn)確地測定三味甘露散中土木香內(nèi)酯和異土木香內(nèi)酯的含量。
關(guān)鍵詞：三味甘露散；高效液相色譜法；土木香內(nèi)酯；異土木香內(nèi)酯
DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2014.11.026
中圖分類號：R284.1 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：1005-5304（2014）11-0085-03
三味甘露散收載于《中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)·藏藥》（第一冊），由藏木香、寒水石（水煮）、異葉青蘭組成[1]。原標(biāo)準(zhǔn)僅有鑒別及常規(guī)檢查項(xiàng)，為更有效地控制該藥品質(zhì)量，本研究采用高效液相色譜法（HPLC）對處方中君藥藏木香的有效成分土木香內(nèi)酯和異土木香內(nèi)酯進(jìn)行定量測定，現(xiàn)報(bào)道如下。
1 儀器與試藥
C18色譜柱（4.6 mm×250 mm，5 ?m），光電二極管陣列檢測器；KQ-250B超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；德國SartoriusR200D型分析天平（十萬分之一）；上海梅特勒AE240型分析天平（萬分之一）。
土木香內(nèi)酯對照品（批號110760-201008）、異土木香內(nèi)酯對照品（批號110761-200204）均購自中國食品藥品檢定研究院；三味甘露散樣品（批號090401、110301）由西藏藏醫(yī)學(xué)院藏藥有限公司提供，陰性樣品自制；乙腈為色譜純，水為超純水，其余試劑均為分析純。
2 方法與結(jié)果
2.1 色譜條件
色譜柱：CAPCELL PAK MG C18（4.6 mm×250 mm，5 ?m）；流動相：乙腈-0.4%磷酸（58∶42）；檢測波長：225 nm；柱溫30 ℃；流速：1.0 mL/min；進(jìn)樣量：10 ?L。
2.2 對照品溶液的制備
取土木香內(nèi)酯對照品、異土木香內(nèi)酯對照品適量，精密稱定，加甲醇制成混合對照品溶液（土木香內(nèi)酯0.020 68 mg/mL，異土木香內(nèi)酯0.026 88 mg/mL），即得。
2.3 供試品溶液的制備
取本品約2 g，研細(xì)，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加甲醇25 mL，密塞，稱定質(zhì)量，超聲處理（功率300 W，頻率40 kHz）30 min，放冷，再稱定質(zhì)量，用甲醇補(bǔ)足減失的質(zhì)量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。
2.4 陰性對照溶液的制備
按處方比例及制備工藝，配制不含藏木香的陰性樣品，并按供試品溶液制備方法制成陰性對照溶液。
2.5 空白試驗(yàn)
分別精密吸取混合對照品溶液、供試品溶液、陰性對照溶液各10 ?L，注入液相色譜儀，測定。色譜圖見圖1。
1.異土木香內(nèi)酯；2.土木香內(nèi)酯
2.6 線性關(guān)系考察
精密吸取混合對照品溶液4、6、8、15、20、25 ?L，注入液相色譜儀，測定含量。結(jié)果表明，土木香內(nèi)酯在0.083～0.517 ?g、異土木香內(nèi)酯在0.108～0.672 ?g范圍內(nèi)均呈良好線性關(guān)系?；貧w方程分別為：土木香內(nèi)酯C=1.389 5×10-7A+2.447 2×10-3，r=0.999 9；異土木香內(nèi)酯C=1.603 6×10-7A+4.106 1×10-3，r=0.999 9。
2.7 精密度試驗(yàn)
精密吸取土木香內(nèi)酯、異土木香內(nèi)酯混合對照品溶液10 ?L，注入高效液相色譜儀，分別進(jìn)樣6次，測定峰面積，RSD分別為0.35%、0.56%，表明儀器精密度良好。
2.8 穩(wěn)定性試驗(yàn)
精密吸取同一供試品溶液（批號090401）10 ?L，分別在0、2、4、6、8、12 h進(jìn)樣，測定峰面積，RSD=0.77%，表明供試品溶液在12 h內(nèi)穩(wěn)定性較好。
2.9 重復(fù)性試驗(yàn)
取同一批樣品（批號090401）6份，按“2.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測定，測得土木香內(nèi)酯平均含量為2.02 mg/g，RSD=1.38%，異土木香內(nèi)酯平均含量為2.58 mg/g，RSD=1.68%，表明該方法重復(fù)性好。
2.10 加樣回收率試驗(yàn)
取已知土木香內(nèi)酯、異土木香內(nèi)酯含量的供試品（批號110301）6份，每份約1 g，精密稱定，置25 mL量瓶中，分別精密加入一定量混合對照品溶液（土木香內(nèi)酯0.182 8 mg/mL、異土木香內(nèi)酯0.191 4 mg/mL），按“2.3”項(xiàng)下方法制備并測定，結(jié)果見表1。
2.11 樣品含量測定
取2批樣品，每批做2份平行樣，分別按“2.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，依次測定土木香內(nèi)酯、異土木香內(nèi)酯含量，結(jié)果見表2。
3 討論
在供試品溶液制備過程中，加甲醇25 mL，分別考察超聲處理10、30、40、60 min，所得樣品測定結(jié)果表明，超聲處理30 min提取效果最佳。
本試驗(yàn)采用HPLC對處方中君藥藏木香的有效成分土木香內(nèi)酯和異土木香內(nèi)酯進(jìn)行測定。氣相色譜法（GC）也是一種分析速度快、分離效率高的分離分析方法，在食品及土壤中農(nóng)藥殘留檢測領(lǐng)域應(yīng)用頗為廣泛[2-3]，常用于測定中藥揮發(fā)性成分[4]。有文獻(xiàn)報(bào)道采用GC測定土木香內(nèi)酯、異土木香內(nèi)酯含量[5-10]。對該制劑我們也采用GC進(jìn)行含量測定，以乙酸乙酯為溶劑超聲提取，氫火焰離子化檢測器檢測，采用程序升溫，測得土木香內(nèi)酯平均含量為2.06 mg/g，異土木香內(nèi)酯平均含量為2.55 mg/g，與HPLC測定結(jié)果比較，含量值較低。因此，采用HPLC測定該處方中土木香內(nèi)酯、異土木香內(nèi)酯的含量，具有操作簡便、快速、結(jié)果準(zhǔn)確等特點(diǎn)，可更有效地控制三味甘露散的質(zhì)量。
參考文獻(xiàn)：
[1] 中華人民共和國衛(wèi)生部藥典委員會.中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)：藏藥（第一冊）[S].1995：258.
[2] 徐芳，王建芬，魏丹丹，等.GC法在檢測農(nóng)藥殘留中的研究進(jìn)展[J].廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010，37（12）：161-163.
[3] 陳衛(wèi)明，鄧天龍，張勤，等.土壤中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留的分析技術(shù)研究進(jìn)展[J].巖礦測試，2009，28（2）：151-156.
[4] 劉峰，馬久太，單娜，等.GC法同時測定冠心疏通膠囊中丁香酚、龍腦和異龍腦[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2011，17（18）：56-59.
[5] 陳曉紅，陳睿，陳元濤，等.果旭阿湯中土木香內(nèi)酯和異土木香內(nèi)酯的含量測定[J].醫(yī)學(xué)導(dǎo)報(bào)，2011，30（9）：1210-1212.
[6] 查松其其格，那松巴乙拉.GC法測定都日布勒吉烏日勒中土木香內(nèi)酯和異土木香內(nèi)酯的含量[J].中國民族醫(yī)藥雜志，2011，17（5）：59-62.
[7] 王燕，王蕓，孫文基.氣相色譜內(nèi)標(biāo)法同時測定土木香中土木香內(nèi)酯、異土木香內(nèi)酯的含量[J].武警醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2010，19（7）：527-529.
[8] 王燕，張雅惠，格桑索朗，等.毛細(xì)管氣相色譜內(nèi)標(biāo)法同時測定藏木香中土木香內(nèi)酯、異土木香內(nèi)酯的含量[J].藥物分析雜志，2009，29（12）：2058-2060.
[9] 童麗，熱增才旦，李文淵.GC法測定藏藥瑪努巴扎中的土木香內(nèi)酯[J].中國中藥雜志，2008，33（14）：1761-1762.
[10] 李慶斌，黃英棟，唐麗麗.氣相色譜法測定冠心蘇合膠囊中土木香內(nèi)酯和異土木香內(nèi)酯的含量[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2011，17（15）：101-102.
（收稿日期：2013-05-28）
（修回日期：2014-04-08；編輯：陳靜）
摘要：目的 建立同時測定三味甘露散中土木香內(nèi)酯、異土木香內(nèi)酯含量的方法。方法 采用高效液相色譜法，光電二極管陣列檢測器，色譜柱為CAPCELL PAK MG C18（4.6 mm×250 mm，5 μm），流動相為乙腈-0.4%磷酸（58∶42），流速1.0 mL/min，檢測波長225 nm，柱溫30 ℃。結(jié)果 土木香內(nèi)酯在0.083～0.517 μg、異土木香內(nèi)酯在0.108～0.672 μg范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系，r=0.999 9；土木香內(nèi)酯平均加樣回收率為97.95%，RSD=1.31%；異土木香內(nèi)酯平均加樣回收率為97.69%，RSD=1.24%。結(jié)論 本方法操作簡便，可快速、準(zhǔn)確地測定三味甘露散中土木香內(nèi)酯和異土木香內(nèi)酯的含量。
關(guān)鍵詞：三味甘露散；高效液相色譜法；土木香內(nèi)酯；異土木香內(nèi)酯
DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2014.11.026
中圖分類號：R284.1 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：1005-5304（2014）11-0085-03
三味甘露散收載于《中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)·藏藥》（第一冊），由藏木香、寒水石（水煮）、異葉青蘭組成[1]。原標(biāo)準(zhǔn)僅有鑒別及常規(guī)檢查項(xiàng)，為更有效地控制該藥品質(zhì)量，本研究采用高效液相色譜法（HPLC）對處方中君藥藏木香的有效成分土木香內(nèi)酯和異土木香內(nèi)酯進(jìn)行定量測定，現(xiàn)報(bào)道如下。
1 儀器與試藥
C18色譜柱（4.6 mm×250 mm，5 ?m），光電二極管陣列檢測器；KQ-250B超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；德國SartoriusR200D型分析天平（十萬分之一）；上海梅特勒AE240型分析天平（萬分之一）。
土木香內(nèi)酯對照品（批號110760-201008）、異土木香內(nèi)酯對照品（批號110761-200204）均購自中國食品藥品檢定研究院；三味甘露散樣品（批號090401、110301）由西藏藏醫(yī)學(xué)院藏藥有限公司提供，陰性樣品自制；乙腈為色譜純，水為超純水，其余試劑均為分析純。
2 方法與結(jié)果
2.1 色譜條件
色譜柱：CAPCELL PAK MG C18（4.6 mm×250 mm，5 ?m）；流動相：乙腈-0.4%磷酸（58∶42）；檢測波長：225 nm；柱溫30 ℃；流速：1.0 mL/min；進(jìn)樣量：10 ?L。
2.2 對照品溶液的制備
取土木香內(nèi)酯對照品、異土木香內(nèi)酯對照品適量，精密稱定，加甲醇制成混合對照品溶液（土木香內(nèi)酯0.020 68 mg/mL，異土木香內(nèi)酯0.026 88 mg/mL），即得。
2.3 供試品溶液的制備
取本品約2 g，研細(xì)，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加甲醇25 mL，密塞，稱定質(zhì)量，超聲處理（功率300 W，頻率40 kHz）30 min，放冷，再稱定質(zhì)量，用甲醇補(bǔ)足減失的質(zhì)量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。
2.4 陰性對照溶液的制備
按處方比例及制備工藝，配制不含藏木香的陰性樣品，并按供試品溶液制備方法制成陰性對照溶液。
2.5 空白試驗(yàn)
分別精密吸取混合對照品溶液、供試品溶液、陰性對照溶液各10 ?L，注入液相色譜儀，測定。色譜圖見圖1。
1.異土木香內(nèi)酯；2.土木香內(nèi)酯
2.6 線性關(guān)系考察
精密吸取混合對照品溶液4、6、8、15、20、25 ?L，注入液相色譜儀，測定含量。結(jié)果表明，土木香內(nèi)酯在0.083～0.517 ?g、異土木香內(nèi)酯在0.108～0.672 ?g范圍內(nèi)均呈良好線性關(guān)系。回歸方程分別為：土木香內(nèi)酯C=1.389 5×10-7A+2.447 2×10-3，r=0.999 9；異土木香內(nèi)酯C=1.603 6×10-7A+4.106 1×10-3，r=0.999 9。
2.7 精密度試驗(yàn)
精密吸取土木香內(nèi)酯、異土木香內(nèi)酯混合對照品溶液10 ?L，注入高效液相色譜儀，分別進(jìn)樣6次，測定峰面積，RSD分別為0.35%、0.56%，表明儀器精密度良好。
2.8 穩(wěn)定性試驗(yàn)
精密吸取同一供試品溶液（批號090401）10 ?L，分別在0、2、4、6、8、12 h進(jìn)樣，測定峰面積，RSD=0.77%，表明供試品溶液在12 h內(nèi)穩(wěn)定性較好。
2.9 重復(fù)性試驗(yàn)
取同一批樣品（批號090401）6份，按“2.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測定，測得土木香內(nèi)酯平均含量為2.02 mg/g，RSD=1.38%，異土木香內(nèi)酯平均含量為2.58 mg/g，RSD=1.68%，表明該方法重復(fù)性好。
2.10 加樣回收率試驗(yàn)
取已知土木香內(nèi)酯、異土木香內(nèi)酯含量的供試品（批號110301）6份，每份約1 g，精密稱定，置25 mL量瓶中，分別精密加入一定量混合對照品溶液（土木香內(nèi)酯0.182 8 mg/mL、異土木香內(nèi)酯0.191 4 mg/mL），按“2.3”項(xiàng)下方法制備并測定，結(jié)果見表1。
2.11 樣品含量測定
取2批樣品，每批做2份平行樣，分別按“2.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，依次測定土木香內(nèi)酯、異土木香內(nèi)酯含量，結(jié)果見表2。
3 討論
在供試品溶液制備過程中，加甲醇25 mL，分別考察超聲處理10、30、40、60 min，所得樣品測定結(jié)果表明，超聲處理30 min提取效果最佳。
本試驗(yàn)采用HPLC對處方中君藥藏木香的有效成分土木香內(nèi)酯和異土木香內(nèi)酯進(jìn)行測定。氣相色譜法（GC）也是一種分析速度快、分離效率高的分離分析方法，在食品及土壤中農(nóng)藥殘留檢測領(lǐng)域應(yīng)用頗為廣泛[2-3]，常用于測定中藥揮發(fā)性成分[4]。有文獻(xiàn)報(bào)道采用GC測定土木香內(nèi)酯、異土木香內(nèi)酯含量[5-10]。對該制劑我們也采用GC進(jìn)行含量測定，以乙酸乙酯為溶劑超聲提取，氫火焰離子化檢測器檢測，采用程序升溫，測得土木香內(nèi)酯平均含量為2.06 mg/g，異土木香內(nèi)酯平均含量為2.55 mg/g，與HPLC測定結(jié)果比較，含量值較低。因此，采用HPLC測定該處方中土木香內(nèi)酯、異土木香內(nèi)酯的含量，具有操作簡便、快速、結(jié)果準(zhǔn)確等特點(diǎn)，可更有效地控制三味甘露散的質(zhì)量。
參考文獻(xiàn)：
[1] 中華人民共和國衛(wèi)生部藥典委員會.中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)：藏藥（第一冊）[S].1995：258.
[2] 徐芳，王建芬，魏丹丹，等.GC法在檢測農(nóng)藥殘留中的研究進(jìn)展[J].廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010，37（12）：161-163.
[3] 陳衛(wèi)明，鄧天龍，張勤，等.土壤中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留的分析技術(shù)研究進(jìn)展[J].巖礦測試，2009，28（2）：151-156.
[4] 劉峰，馬久太，單娜，等.GC法同時測定冠心疏通膠囊中丁香酚、龍腦和異龍腦[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2011，17（18）：56-59.
[5] 陳曉紅，陳睿，陳元濤，等.果旭阿湯中土木香內(nèi)酯和異土木香內(nèi)酯的含量測定[J].醫(yī)學(xué)導(dǎo)報(bào)，2011，30（9）：1210-1212.
[6] 查松其其格，那松巴乙拉.GC法測定都日布勒吉烏日勒中土木香內(nèi)酯和異土木香內(nèi)酯的含量[J].中國民族醫(yī)藥雜志，2011，17（5）：59-62.
[7] 王燕，王蕓，孫文基.氣相色譜內(nèi)標(biāo)法同時測定土木香中土木香內(nèi)酯、異土木香內(nèi)酯的含量[J].武警醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2010，19（7）：527-529.
[8] 王燕，張雅惠，格桑索朗，等.毛細(xì)管氣相色譜內(nèi)標(biāo)法同時測定藏木香中土木香內(nèi)酯、異土木香內(nèi)酯的含量[J].藥物分析雜志，2009，29（12）：2058-2060.
[9] 童麗，熱增才旦，李文淵.GC法測定藏藥瑪努巴扎中的土木香內(nèi)酯[J].中國中藥雜志，2008，33（14）：1761-1762.
[10] 李慶斌，黃英棟，唐麗麗.氣相色譜法測定冠心蘇合膠囊中土木香內(nèi)酯和異土木香內(nèi)酯的含量[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2011，17（15）：101-102.
（收稿日期：2013-05-28）
（修回日期：2014-04-08；編輯：陳靜）
摘要：目的 建立同時測定三味甘露散中土木香內(nèi)酯、異土木香內(nèi)酯含量的方法。方法 采用高效液相色譜法，光電二極管陣列檢測器，色譜柱為CAPCELL PAK MG C18（4.6 mm×250 mm，5 μm），流動相為乙腈-0.4%磷酸（58∶42），流速1.0 mL/min，檢測波長225 nm，柱溫30 ℃。結(jié)果 土木香內(nèi)酯在0.083～0.517 μg、異土木香內(nèi)酯在0.108～0.672 μg范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系，r=0.999 9；土木香內(nèi)酯平均加樣回收率為97.95%，RSD=1.31%；異土木香內(nèi)酯平均加樣回收率為97.69%，RSD=1.24%。結(jié)論 本方法操作簡便，可快速、準(zhǔn)確地測定三味甘露散中土木香內(nèi)酯和異土木香內(nèi)酯的含量。
關(guān)鍵詞：三味甘露散；高效液相色譜法；土木香內(nèi)酯；異土木香內(nèi)酯
DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2014.11.026
中圖分類號：R284.1 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：1005-5304（2014）11-0085-03
三味甘露散收載于《中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)·藏藥》（第一冊），由藏木香、寒水石（水煮）、異葉青蘭組成[1]。原標(biāo)準(zhǔn)僅有鑒別及常規(guī)檢查項(xiàng)，為更有效地控制該藥品質(zhì)量，本研究采用高效液相色譜法（HPLC）對處方中君藥藏木香的有效成分土木香內(nèi)酯和異土木香內(nèi)酯進(jìn)行定量測定，現(xiàn)報(bào)道如下。
1 儀器與試藥
C18色譜柱（4.6 mm×250 mm，5 ?m），光電二極管陣列檢測器；KQ-250B超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；德國SartoriusR200D型分析天平（十萬分之一）；上海梅特勒AE240型分析天平（萬分之一）。
土木香內(nèi)酯對照品（批號110760-201008）、異土木香內(nèi)酯對照品（批號110761-200204）均購自中國食品藥品檢定研究院；三味甘露散樣品（批號090401、110301）由西藏藏醫(yī)學(xué)院藏藥有限公司提供，陰性樣品自制；乙腈為色譜純，水為超純水，其余試劑均為分析純。
2 方法與結(jié)果
2.1 色譜條件
色譜柱：CAPCELL PAK MG C18（4.6 mm×250 mm，5 ?m）；流動相：乙腈-0.4%磷酸（58∶42）；檢測波長：225 nm；柱溫30 ℃；流速：1.0 mL/min；進(jìn)樣量：10 ?L。
2.2 對照品溶液的制備
取土木香內(nèi)酯對照品、異土木香內(nèi)酯對照品適量，精密稱定，加甲醇制成混合對照品溶液（土木香內(nèi)酯0.020 68 mg/mL，異土木香內(nèi)酯0.026 88 mg/mL），即得。
2.3 供試品溶液的制備
取本品約2 g，研細(xì)，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加甲醇25 mL，密塞，稱定質(zhì)量，超聲處理（功率300 W，頻率40 kHz）30 min，放冷，再稱定質(zhì)量，用甲醇補(bǔ)足減失的質(zhì)量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。
2.4 陰性對照溶液的制備
按處方比例及制備工藝，配制不含藏木香的陰性樣品，并按供試品溶液制備方法制成陰性對照溶液。
2.5 空白試驗(yàn)
分別精密吸取混合對照品溶液、供試品溶液、陰性對照溶液各10 ?L，注入液相色譜儀，測定。色譜圖見圖1。
1.異土木香內(nèi)酯；2.土木香內(nèi)酯
2.6 線性關(guān)系考察
精密吸取混合對照品溶液4、6、8、15、20、25 ?L，注入液相色譜儀，測定含量。結(jié)果表明，土木香內(nèi)酯在0.083～0.517 ?g、異土木香內(nèi)酯在0.108～0.672 ?g范圍內(nèi)均呈良好線性關(guān)系?；貧w方程分別為：土木香內(nèi)酯C=1.389 5×10-7A+2.447 2×10-3，r=0.999 9；異土木香內(nèi)酯C=1.603 6×10-7A+4.106 1×10-3，r=0.999 9。
2.7 精密度試驗(yàn)
精密吸取土木香內(nèi)酯、異土木香內(nèi)酯混合對照品溶液10 ?L，注入高效液相色譜儀，分別進(jìn)樣6次，測定峰面積，RSD分別為0.35%、0.56%，表明儀器精密度良好。
2.8 穩(wěn)定性試驗(yàn)
精密吸取同一供試品溶液（批號090401）10 ?L，分別在0、2、4、6、8、12 h進(jìn)樣，測定峰面積，RSD=0.77%，表明供試品溶液在12 h內(nèi)穩(wěn)定性較好。
2.9 重復(fù)性試驗(yàn)
取同一批樣品（批號090401）6份，按“2.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測定，測得土木香內(nèi)酯平均含量為2.02 mg/g，RSD=1.38%，異土木香內(nèi)酯平均含量為2.58 mg/g，RSD=1.68%，表明該方法重復(fù)性好。
2.10 加樣回收率試驗(yàn)
取已知土木香內(nèi)酯、異土木香內(nèi)酯含量的供試品（批號110301）6份，每份約1 g，精密稱定，置25 mL量瓶中，分別精密加入一定量混合對照品溶液（土木香內(nèi)酯0.182 8 mg/mL、異土木香內(nèi)酯0.191 4 mg/mL），按“2.3”項(xiàng)下方法制備并測定，結(jié)果見表1。
2.11 樣品含量測定
取2批樣品，每批做2份平行樣，分別按“2.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，依次測定土木香內(nèi)酯、異土木香內(nèi)酯含量，結(jié)果見表2。
3 討論
在供試品溶液制備過程中，加甲醇25 mL，分別考察超聲處理10、30、40、60 min，所得樣品測定結(jié)果表明，超聲處理30 min提取效果最佳。
本試驗(yàn)采用HPLC對處方中君藥藏木香的有效成分土木香內(nèi)酯和異土木香內(nèi)酯進(jìn)行測定。氣相色譜法（GC）也是一種分析速度快、分離效率高的分離分析方法，在食品及土壤中農(nóng)藥殘留檢測領(lǐng)域應(yīng)用頗為廣泛[2-3]，常用于測定中藥揮發(fā)性成分[4]。有文獻(xiàn)報(bào)道采用GC測定土木香內(nèi)酯、異土木香內(nèi)酯含量[5-10]。對該制劑我們也采用GC進(jìn)行含量測定，以乙酸乙酯為溶劑超聲提取，氫火焰離子化檢測器檢測，采用程序升溫，測得土木香內(nèi)酯平均含量為2.06 mg/g，異土木香內(nèi)酯平均含量為2.55 mg/g，與HPLC測定結(jié)果比較，含量值較低。因此，采用HPLC測定該處方中土木香內(nèi)酯、異土木香內(nèi)酯的含量，具有操作簡便、快速、結(jié)果準(zhǔn)確等特點(diǎn)，可更有效地控制三味甘露散的質(zhì)量。
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（收稿日期：2013-05-28）
（修回日期：2014-04-08；編輯：陳靜）
